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MMP-2-实验搜索-丁香通

作者:admin 来源:未知  点击:129
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  通过 DEAE 纤维素柱纯化,除去少量 DNA、大分子 RNA、蛋白质、多糖等杂质,最后得到各种氨基酸专一性 tRNA 的混合物.

  利用 SDS 裂解细胞 ,并用酸性苯酚分级提取细胞总 RNA, 这是一种适合于处理 mRNA 含量相对较低、内源性 RNase 活性较髙的细胞的方法,该方法 RNA 损失极少,简便易行 ,可同时处理多个样品。对大多数细胞株来说,在一个直径 90mm 培养皿中培养细胞 ,其 RNA 收率为 100〜2

  培养物用甲醇固定,直接用未稀释的 Giemsa 液进行染色,然后1:10 稀释染液,清洗培养物,在潮湿状态下观察。

  在微酸的条件下,乙二醛的两个乙醛基与鸟苷的亚氨基相互作用形成环状化合物,抑制了链间 Watson-Crick 键的形成,使 RNA不能形成稳定的二级结构,它在琼脂糖凝胶电泳中的迁移率与其大小的对数成正比。

  通常难以利用较大的活检标本和由其提供的一切有价值的材料。在这些情况下,可通过冷冻保存组织。 来源:动物细胞培养:基础技术指南第五版

  在无抗生素情况下,至少将细胞培养一周,将培养上清转移至处于对数生长早期的指示细胞中,孵育 3~5d ,将细胞固定和染色,寻找细胞核之外的荧光。

  RNA 标准转录体系的一般回收率为 lugRNA/ug 质粒 DNA, 使用下面的方法,可以提高回收率至 5〜l0ug RNA/ug 质粒 DNA。大量制备 RNA 可以用于体外翻译。488700皇家论坛皇家论坛香港坛网

  此为特异性检测IL-12异二聚体的方法。因为不能检测IL-12 p4 0 单 体 ,因此本方法能够在过量IL-12 p4 0 亚基存在的情况下检测IL-12 p7 5 异二聚体。 作者:J.E.科利根等,译者:曹雪涛等,本实验来自「精编免疫学实验指南」

  介绍 了 使 用 鼠 IL-2和 IL- 4 的中和抗体,在一种细胞因子存在的情况下来检测并定量其中一种细胞因子的方法。由于小鼠细胞不能针对人IL- 4产生应答,使用细胞株对建立人IL-2的特异性测定方法非常有用。可供选择的方法还有采用人IL- 4 受 体 cD N A转 染 的 CT.4S

  去除培养基,加人胰蛋白酶短暂作用,孵育,以培养基分散细胞,计数,稀释并再接种。

  收集对数生长晚期的同源或异源细胞系的培养基,过滤,根据需要用新鲜培养基稀释。

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